中国科学院大学学报 ›› 2007, Vol. 24 ›› Issue (3): 362-367.DOI: 10.7523/j.issn.2095-6134.2007.3.015
刘利新 刘树峰 常乃柏 刘辉 王嵬
1中国科学院研究生院生物系,北京 100049;
2 中国科学院生物物理研究所 北京 100101;
3 卫生部北京医院血液科;北京 1000730
LIU Li-Xin, LIU Shu-Feng, Chang Nai-Bai, Liu Hui, Wang Wei
摘要: mRNA在细胞质内的稳定性是调控基因表达的重要方式。细胞以mRNA降解的方式对过时的、突变有害的mRNA进行及时清除以保证基因的正确表达和细胞正常的生命活动。其中脱帽酶Dcp1/Dcp2在mRNA降解中起到主要作用,但对其降解mRNA的详细作用机制了解甚少。到目前为止,尚没有该基因市售的抗体出现,阻碍了对该基因机理的研究。本文目的是利用PCR方法,从人的胎肝文库中克隆到Dcp2基因,制备其多克隆抗体血清。实验结果显示,通过溴化氰偶联柱子对该多克隆抗体血清经纯化得到的多克隆抗体,用于Western Blotting 试验,可以检测到该蛋白内源性的表达;用于激光共聚焦定位实验显示该内源性蛋白定位在细胞核内;此抗体同时可用于免疫沉淀实验。因此Dcp2基因和多克隆抗体的获得,为进一步研究该基因的功能创造了条件。
中图分类号: